Антибиотикограмма расшифровка анализа

Сайт предоставляет справочную информацию исключительно для ознакомления. Диагностику и лечение заболеваний нужно проходить под наблюдением специалиста. У всех препаратов имеются противопоказания. Консультация специалиста обязательна!

Антибиотикограмма. Что это такое?

Антибиотикограмма – это лабораторное исследование, позволяющее определить чувствительность различных бактерий к тем или иным антибактериальным препаратам (антибиотикам). Это необходимо, для того чтобы правильно подобрать лечение того или иного инфекционного заболевания и предотвратить назначение ненужных, неэффективных антибиотиков.

Чтобы понять цель данного исследования и его суть, нужны определенные знания о бактериальных инфекциях и о методах их лечения. Бактерии – это клеточные формы жизни, которые могут проникать в человеческий организм и начинать размножаться в нем.
Некоторые бактерии живут в человеческом организме постоянно, при этом не вызывая никаких заболеваний (они называются непатогенными). В то же время, другие бактерии могут поражать различные ткани и органы, приводя к развитию инфекционных заболеваний.

Для лечения инфекционных заболеваний, вызванных бактериями, применяются антибиотики. Антибиотики – это натуральные или искусственно синтезированные вещества, которые обладают способностью разрушать бактерии или же прерывать процесс их размножения (деления), тем самым, способствуя их выведению из организма больного человека.

Проблема заключается в том, что различные бактерии чувствительны к различным антибиотикам. Так, например, первый антибиотик может уничтожать один тип бактерий, при этом, не оказывая абсолютно никакого действия на другие. В то же время, второй антибиотик может быть эффективным против других типов бактерий и так далее. Если после выявления признаков инфекции начать назначать пациенту антибиотики, к которым возбудитель инфекции не чувствителен, никакого эффекта от такого лечения не будет (бактерии продолжат размножаться в организме человека, а заболевание будет прогрессировать). Антибиотикограмма позволяет определить, к какому именно антибиотику чувствителен конкретный возбудитель, вызвавший заболевание у конкретного пациента, что позволяет врачу подобрать максимально эффективное лечение.

Антибиотикограмма. Консультация специалиста

Показания к антибиотикограмме

Грубо говоря, показанием к антибиотикограмме является наличие симптомов любой бактериальной инфекции. Данные симптомы могут быть весьма разнообразными (в зависимости от вида инфекции, состояния здоровья пациента, возраста пациента и других факторов), однако есть общие признаки, наблюдающиеся при большинстве инфекционных заболеваний.

На наличие бактериальной инфекции может указывать:

• повышение температуры тела (иногда до 39 – 40 градусов и выше);
• кашель;
• общая слабость;

• повышенная утомляемость;
• боли в мышцах;
• снижение аппетита;
• наличие гнойных выделений (из горла, половых путей, раны);
• лабораторные признаки инфекции (повышение в крови уровня лейкоцитов – клеток иммунной системы) и так далее.

Показаниями к антибиотикограмме могут быть:

• инфекции дыхательных путей;
• инфекции желудочно-кишечного тракта;
• мочеполовые инфекции;
• системные инфекции;
• инфицирование крови;
• раневые инфекции;
• инфекции глаз;
• ушные инфекции;
• кожные инфекции;
• инфекционные заболевания внутренних органов (печени, почек, легких, сердца, головного мозга) и так далее.

Забор материала для антибиотикограммы

Чтобы провести исследование, вначале нужно получить от больного человека биологический материал, в котором должны содержаться живые бактерии. В качестве материала может быть использована практически любая ткань или жидкость человеческого организма, а также патологические жидкости и выделения, образующиеся в результате развития инфекционно-воспалительного процесса (например, гной).

Для проведения антибиотикограммы могут быть использованы:

• кровь;
• мокрота;
• моча;
• каловые массы;
• сперма;
• спинномозговая жидкость;
• мазки со слизистых оболочек;
• участки омертвевших тканей;
• гнойные выделения и так далее.

Подготовка к забору анализов на антибиотикограмму

Чтобы исследование было информативным, нужно соблюдать ряд правил и рекомендаций относительно забора биологического материала.

При заборе материала для антибиотикограммы следует:

• Строго соблюдать условия стерильности. Забор материала должен проводиться в стерильных условиях и стерильными (обеззараженными) инструментами. Любой контакт биологического материала с посторонними предметами (в том числе с руками медсестры) или с воздухом из окружающей среды может исказить результаты антибиотикограммы. Дело в том, что в окружающем нас воздухе и абсолютно на всех окружающих предметах имеется множество различных бактерий. При контакте с исследуемым материалом они непременно попадут в него, вследствие чего во время проведения исследования могут быть выявлены врачом-лаборантом даже в том случае, если изначально материал (кровь, моча и так далее) был стерилен и не содержал возбудителей инфекции. Это приведет к ложноположительному результату исследования и может стать причиной ненужного или неэффективного лечения.
• Производить забор материала до начала лечения антибиотиками. Как было сказано ранее, целью антибиотикограммы является определить чувствительность бактерий к определенным антибиотикам. Если материал для исследования будет набран после того как пациент начнет получать антибиотики, рост и активность бактерий могут значительно снизиться (из-за антибактериального действия принимаемых препаратов), вследствие чего провести исследование не получится. Следовательно, забор материала рекомендуется проводить до назначения какого-либо антибиотика. Исключением могут быть случаи, когда на фоне длительного лечения антибиотиками состояние пациента не улучшается, что может свидетельствовать об устойчивости возбудителя инфекции к используемым препаратам. В подобных ситуациях забор материала можно проводить даже на фоне лечения антибиотиками.

Забор крови

Предварительно определив место укола, медсестра 2 раза обрабатывает кожу в данной области 70% раствором спирта. Это позволяет уничтожить большинство имеющихся на коже бактерий, тем самым, предотвратив их попадание в иглу в момент забора анализа. После этого она распаковывает стерильный одноразовый шпиц и прокалывает кожу в обработанной области, стараясь не касаться иглой других участков кожи или каких-либо поверхностей. Попав в вену, медсестра набирает в шприц несколько миллилитров крови, после чего удаляет иглу из вены (на место прокола при этом прикладывается ватный шарик, смоченный в спирте). Отсоединив иглу, медсестра осторожно переливает набранный материал в специальную стерильную пробирку и герметично закрывает ее пробкой или крышечкой, после чего направляет в лабораторию для дальнейшего исследования.

Забор мокроты

Мокрота – это густые, слизистые выделения из дыхательных путей пациента, которые появляются при наличии некоторых инфекционных и неинфекционных заболеваний. Иногда мокрота может выделяться одновременно с кашлем.

Сложность забора мокроты заключается в том, что при прохождении через ротовую полость больного (например, при кашле) она покрывается множеством бактерий, которые присутствуют во рту у всех людей, однако обычно не вызывают развития каких-либо заболеваний. При проведении исследования данные бактерии могут затруднить оценку результатов. Чтобы это предотвратить, накануне вечером и утром перед сдачей анализа пациенту следует тщательно (в течение 3 минут) почистить зубы. Непосредственно перед забором материала ему следует 2 – 3 раза прополоскать рот теплой кипяченой водой, что позволит удалить часть бактерий с поверхности слизистых оболочек ротовой полости, тем самым, снизив вероятность их попадания в биоматериал.

Забор материала проводится в стерильную баночку (плевательницу), которую следует брать в лаборатории. Крышку банки следует открывать непосредственно перед забором материала. Во время очередного приступа кашля отделившуюся мокроту следует как можно скорее выплюнуть в баночку, стараясь не держать ее во рту слишком долго (при возможности ее следует откашливать прямо в плевательницу). Сразу после этого следует закрыть банку крышкой и отнести ее в лабораторию. При заборе материала баночку следует держать только за боковые поверхности или снизу. Запрещается касаться пальцами внутренней поверхности баночки (которая стерильна), а также ее краев (когда она открыта), чтобы бактерии с пальцев рук не попали в исследуемый материал.

Если пациент находится в больнице и по тем или иным причинам не может самостоятельно откашливать мокроту, она может быть получена при помощи специального исследования – бронхоскопии. Суть его заключается в следующем. В стерильных условиях врач вводит в дыхательные пути пациента специальную стерильную трубку, оснащенную видеокамерой или другой оптической системой. Через эту трубку производится забор мокроты, которая затем также помещается в стерильную посуду и направляется на исследование.

Забор мочи

Забор мочи производится в стерильную посуду (баночку), которую также следует брать в лаборатории. Набирать мочу лучше всего утром, так как в мочевом пузыре собирается вся ночная моча, и вероятность обнаружения бактерий в ней повышена. Накануне перед забором материала пациенту следует выполнить туалет половых органов и промежности, используя при этом гигиенические средства (мыло, гель для душа).

Проснувшись утром, пациенту следует еще раз протереть или промыть половые органы теплой кипяченой водой (без использования мыла или других гигиенических средств). Это позволит удалить бактерии, которые непременно там появятся за ночь. Только после этого можно приступать к забору анализа. Первую порцию мочи (первые 2 секунды от начала мочеиспускания) следует пропустить, так как в ней могут содержаться бактерии из мочеполовых путей. После этого следует подставить под струю мочи открытую стерильную баночку и набрать в нее около 100 мл материала. Затем баночку следует немедленно закрыть крышкой и доставить в лабораторию. Касаться внутренней поверхности или краев баночки также запрещается.

Забор кала

Проводить процедуру можно как в домашних условиях, так и в поликлинике или в больнице. Для забора каловых масс также нужно взять в лаборатории специальный стерильный контейнер, к которому иногда может прилагаться стерильная палочка.

Подготовка к забору кала включает:

• Гигиену промежности и анальной области. Перед забором материала следует выполнить гигиенические мероприятия, используя мыло или гель для душа. В конце следует тщательно смыть гигиеническое средство с кожи и анальной области большим количеством теплой воды, так как его попадание в каловые массы может исказить результаты исследования.
• Опорожнение мочевого пузыря. Акт дефекации в норме сопровождается и мочеиспусканием. Однако если в каловые массы попадет моча, это может исказить результаты исследования (например, содержащиеся в моче бактерии могут попасть в набранный материал).

Непосредственно перед началом дефекации следует разместить под анальным отверстием пластиковый пакет или контейнер, в который следует опорожнить кишечник. Затем, надев резиновые перчатки, следует набрать в стерильный контейнер около 20 – 50 грамм каловых масс, используя при этом стерильную палочку, выданную в лаборатории (если ее нет, можно использовать стерильные ушные палочки или стерильный бинт, который следует намотать на любую палочку в несколько слоев).

После забора материала закрытую коробочку следует как можно скорее доставить в лабораторию.

Забор спермы

Забор спинномозговой жидкости

Спинномозговая жидкость (СМЖ) располагается в находящемся в позвоночнике спинномозговом канале и омывает головной и спинной мозг. В норме она стерильна (не содержит бактерий). Чтобы набрать СМЖ для исследования, следует выполнить так называемую спинальную пункцию. Делать это должен только опытный специалист (реаниматолог, инфекционист, невролог) и только в условиях стационара.

Суть процедуры заключается в следующем. Пациент оголяет верхнюю часть тела, после чего ложится на бок или садится на стул задом наперед, опираясь локтями о спинку стула. При этом врач попросит его как можно сильнее согнуть спину, что облегчит выполнение процедуры. После этого, надев стерильные перчатки и маску, врач несколько раз обрабатывает кожу пациента в поясничной области спиртовым раствором, чтобы уничтожить все имеющиеся там бактерии. Затем, используя тонкую и длинную иглу, врач прокалывает кожу и мягкие ткани, проводя иглу между двумя соседними позвонками и вводя ее в спинномозговой канал. Как только игла попадет в данный канал, по ней начнет выделяться спинномозговая жидкость (выделяется она медленно, примерно по 1 капле в секунду). Подставив под конец иглы стерильную пробирку, врач набирает в нее около 2 мл жидкости, после чего закрывает ее стерильной пробкой и направляет в лабораторию. Затем игла извлекается, а на место прокола накладывается стерильная повязка.

Мазок со слизистой зева, урогенитального тракта

Антибиотикограмма при беременности

Антибиотикограмма и посев – это одно и то же?

Данные исследования отличаются друг от друга по технике выполнения, однако их результаты дополняют друг друга. Более того, перед проведением антибиотикограммы обязательно следует выполнять посев (бакпосев, бактериологический посев на флору). Целью данной процедуры является выявление искомой бактерии, то есть подтверждение того, что она есть в исследуемом материале. Для этого полученный материал засевается в специальные пробирки с питательными средами (питательная среда – это набор веществ, которые идеально подходят для роста и размножения различных видов бактерий), где выращивается в течение нескольких суток.
Когда колонии бактерий станут достаточно большими, врач исследует их различными методами (под микроскопом, с помощью химических реакций и так далее), что позволяет точно определить вид, тип и род возбудителя инфекции, тем самым, подтвердив диагноз.

Только когда вид возбудителя инфекции установлен, можно приступать к определению его чувствительности к различным антибиотикам (то есть, непосредственно к антибиотикограмме).

Методика проведения антибиотикограммы

Само исследование проводится в лабораторных условиях, где существуют все необходимое оборудование для выращивания бактерий.

Для выполнения антибиотикограммы используются:

• Чашки Петри – плоские стеклянные баночки с высокими краями, которые могут закрываться стеклянными крышками.
• Питательные среды – питательны среды наносятся на дно чашек Петри в стерильных условиях.
• Антибиотики – различные виды антибактериальных препаратов в виде маленьких дисков.
• Инкубатор – создает оптимальные условия (температуру, влажность и так далее) для роста бактерий.

Техника выполнения антибиотикограммы заключается в следующем. Полученные в результате посева патогенные микроорганизмы, которые нужно исследовать, засеваются на питательные среды в чашки Петри. Затем врач устанавливает на дно чашки несколько маленьких бумажных дисков, пропитанных различными антибиотиками. Диски должны располагаться на определенном расстоянии друг от друга. При необходимости для проведения исследования могут быть использованы две, три или более чашек Петри, в каждой из которых будут находиться разные антибиотики. Затем чашки накрываются стеклянными крышками и помещаются в инкубатор на несколько часов или суток. После их извлечения врач оценивает результаты.

Расшифровка результатов антибиотикограммы (что значит чувствительность, устойчивость, резистентность?)

Суть антибиотикограммы заключается в следующем. Помещенные на питательную среду бактерии сразу же начинают размножаться, в результате чего в норме они должны будут заполнить дно чашки Петри через определенное время. Растущие колонии бактерий при этом можно будет заметить невооруженным глазом. Если вместе с бактериями на дно чашки помести антибактериальные препараты, это может нарушить процесс роста бактерий, что также будет видно при оценке результатов.

Если содержащийся в диске антибиотик эффективен против данной бактерии, он будет проникать в питательную среду, подавляя рост и размножение возбудителей в определенном радиусе вокруг себя (то есть, вокруг него бактерии расти не будут). Если же антибиотик неэффективен против данных бактерий, они будут свободно расти в непосредственной близости от диска.

Оценка результатов антибиотикограммы проводится следующим образом. Через несколько дней пребывания бактерий в инкубаторе врач извлекает чашки Петри и оценивает их визуально. Те антибиотики, вокруг которых колонии бактерий не растут, считаются эффективными, а те, вокруг которых растут – неэффективными.

Результат исследования распечатывается на бумаге в виде таблицы, в первом столбике которой указывается название антибиотика, а во втором – его эффективность, обозначающаяся английскими буквами S, R или I.

Результаты антибиотикограммы могут быть следующими:

• «S» (sensitive – чувствительный). Бактерия чувствительна к данному антибиотику. Его следует применять в качестве основного препарата для лечения данной инфекции.
• «R» (resistant – резистентный, устойчивый). Бактерия не чувствительна к данному антибиотику. Его применение не даст никаких положительных результатов при лечении данной инфекции.
• «I» (intermediate – промежуточный). Рост бактерий вокруг диска с антибиотиком подавлен, однако лишь частично (в меньшей степени, чем вокруг антибиотиков, к которым бактерия чувствительна). Данный препарат может быть использован для лечения инфекции в особых случаях (например, если в лечебном учреждении нет антибиотиков, к которым бактерия чувствительна, а также, если у пациента имеется аллергия на необходимые антибиотики), однако доза и длительность лечения должны быть увеличены.

Где сделать антибиотикограмму?

Записаться на антибиотикограмму

Чтобы записаться на прием к врачу или диагностику, Вам достаточно позвонить по единому номеру телефона
+7 495 488-20-52 в Москве

+7 812 416-38-96 в Санкт-Петербурге

Оператор Вас выслушает и перенаправит звонок в нужную клинику, либо примет заказ на запись к необходимому Вам специалисту.

В Москве

Название лечебного учреждения (лаборатории)

Бактерии и антибиотики

Все бактерии, способные вызвать заболевание у человека, подразделяются на патогенные и условно-патогенные. Патогенные микроорганизмы — это те, которых у здорового человека быть не должно. Они попадают в организм из окружающей среды и вызывают патологический процесс.

Условно-патогенная флора — это бактерии, которые в норме проживают в организме человека, не вызывая заболеваний. Но при снижении иммунной защиты и дисбиозе активизируются и размножаются, что приводит к развитию болезни.

Лечение бактериальных заболеваний проводят антибиотиками. Нет одного универсального препарата, который бы действовал на все бактерии сразу. Существует более 20 групп антибиотиков, эффективных против разных бактерий. Чтобы определить, какой именно препарат нужен для лечения, и назначают антибиотикограмму.

Правила забора материала для антибиотикограммы

Бактерии вызывают заболевания разных органов и обнаруживаются в разных средах организма — кровь, моча, кал, мокрота. Чтобы получить достоверные результаты, материал для исследования нужно собирать правильно.

Забор крови делает медсестра в процедурном кабинете. Для исследования берется венозная кровь, ее собирают в стерильную пробирку и сразу отправляют в лабораторию.

Мазок из зева и носоглотки берет медсестра или врач. Стерильным тампоном собирают слизь из носовых ходов, с задней стенки глотки. Тампон помещают в стерильную пробирку или сразу на питательную среду.

Желательно, чтобы материал был доставлен в лабораторию не позднее трех часов после забора.

Влагалищную и шеечную слизь собирает гинеколог. Женщина располагается на гинекологическом кресле, а врач с помощью специального инструмента собирает слизь. Ее помещают в стерильную пробирку и отдают для исследования.

Мочу и кал собирают дома. Перед мочеиспусканием и дефекацией нужно тщательно подмыться. В стерильный контейнер собирают среднюю порцию мочи. Дефекацию рекомендуется совершать в чисто вымытое судно или другую емкость. Оттуда стерильной лопаточкой собрать кал и поместить в стерильный контейнер.

Если у человека острое заболевание, анализы делают до назначения антибактериальной терапии. На фоне даже однократного приема антибиотиков состав патогенной флоры меняется. Если же у человека длительно текущий патологический процесс, плохо поддающийся терапии, то исследование делают даже на фоне приема противомикробных препаратов.

Техника лабораторного исследования

Для определения чувствительности бактерий нужно сделать посев материала на питательную среду. Используют для этого чашку Петри, куда помещают питательную среду. На поверхность кладут бумажные диски, пропитанные антибиотиками. Обычно в одну чашку помещается пять дисков. Если нужно исследовать большее количество препаратов, берут две или три чашки.

Затем на поверхность среды мазками наносят материал, который нужно исследовать. Чашки помещают в термостат — это тепловой шкаф, в котором поддерживается температура 37 градусов. Она оптимальна для выращивания бактериальных колоний. Через 24–72 часа появляются колонии микроорганизмов.

Если микроб чувствителен к антибиотику, вокруг бумажного диска роста не будет. Если же бактерия резистентна, то есть устойчива, рост будет наблюдаться даже рядом с пропитанным диском.

Как расшифровать анализ

Бланк ответа на исследование заполняется лаборантом. Вверху бланка пишут, какой материал и откуда был взят. Отмечают фамилию и инициалы пациента, его пол и возраст. Затем пишут, какие бактерии и в каком количестве были выделены. Кровь и моча в норме стерильны.

В кале здорового человека присутствуют лактобактерии, условно-патогенная флора — кишечная палочка, протей, клебсиеллы. Количество условно-патогенной флоры не должно превышать 10 в третьей степени на 1 мл кала. В содержимом зева и носоглотки тоже обнаруживают условно-патогенную флору — стафилококки, стрептококки. Их количество не должно быть больше 10 в четвертой степени на 1 мл слизи.

Ниже ставится перечень антибиотиков, к которым определялась чувствительность. Напротив каждого препарата выставляют букву, обозначающую степень чувствительности. Что означает S и R в бланке:

• S — бактерия восприимчива к данному антибиотику, его можно использовать для лечения;
• I — промежуточный вариант, микроб умеренно чувствителен, препарат можно использовать для лечения, если другого лекарства нет или у человека имеется его непереносимость;
• R — микроб абсолютно устойчив к антибиотику, препарат для лечения не подходит.

Анализ выполняют в течение трех дней, поэтому пациенту сначала назначают препарат широкого спектра действия, подходящий по клинике заболевания. Когда же будет получена расшифровка анализа, врач оставляет прежний препарат или меняет его на другой.

Профилактика резистентности

Развитие антибиотикорезистентности связано с бесконтрольным приемом препаратов. Антибиотики показаны только при подтвержденном бактериальном происхождении заболевания. Назначенный курс нужно принимать полностью, даже если самочувствие улучшилось на второй-третий день.

Все большее число бактерий становится устойчивыми к лекарствам. А новых препаратов не изобретают. Это грозит возникновением эпидемий инфекционных заболеваний с высокой смертностью.

Определение чувствительности бактерий к антибиотикам важно для назначения эффективной терапии. Для исследования можно взять любую биологическую жидкость. Чтобы не исказить результаты, материал нужно собирать в стерильную емкость. Исследование рекомендуется делать всем пациентам с признаками бактериальной инфекции.

Известно, что микроорганизмы, невзирая на свой «малый рост», тоже имеют пищевые «пристрастия», температурный оптимум, в общем, среду, которая им идеально подходит, где они чувствуют себя комфортно и хорошо, а поэтому начинают интенсивно размножаться и расти.

Бактериологический посев или, как принято называть короче – бак посев, применяется для получения большого количества микробов одного вида (чистая культура) с целью изучения их физико-химических и биологических свойств, чтобы затем полученные данные использовать для диагностики инфекционных заболеваний.

К сожалению, даже популярные нынче иммуноферментный анализ (ИФА), полимеразная цепная реакция (ПЦР) и другие методы, основным недостатком которых являются ложноположительные или ложноотрицательные результаты, не всегда могут идентифицировать возбудителя. Кроме того, они не способны подобрать антибактериальные препараты направленного действия. Подобную задачу решает бак посев, который часто не спешат назначать, ссылаясь на то, что, например, уреа- микоплазмы медленно культивируется, а стоимость анализа немалая. Однако ведь и здоровье того стоит!

Для питания и дыхания нужны условия

Микробиологи нынче знают, что каждому возбудителю нужна своя «родная» среда с учетом ее рН, окислительно-восстановительных потенциалов, вязкости, влажности и осмотических свойств. Среды могут быть мягкими и твердыми, простыми и сложными, универсальными и не очень, однако во всех случаях они должны обеспечивать питание, дыхание, размножение и рост бактериальной клетки.

пример роста микроорганизмов после бак-посева в питательную среду

Некоторые среды (тиогликолевая, Сабуро) подходят для широкого круга микроорганизмов и называются универсальными. Другие же предназначены только для определенных видов, например, пневмококк и золотистый стафилококк, продуцирующие гемолизины, растут на кровяном агаре, который служит для выделения особо «капризных» и, вместе с тем, опасных штаммов. Таким образом, разновидностей сред множество, где каждая из них выращивает свой круг микроорганизмов.

Цель культивирования микроорганизмов и значимость ее для диагностики

Кроме воды, воздуха, почвы, содержащие в тех или иных концентрациях различные микроорганизмы, в том числе и приносящие болезнь (патогенные), многие отрасли медицинской науки интересуют микробы, живущие на коже и слизистых человеческого организма, которые могут быть представлены:

• Постоянными обитателями, не несущими никакой опасности человеку, то есть, нормальной микрофлорой организма, без которой мы просто жить не можем. Например, исчезновение бактерий, живущих в кишечнике и участвующих в процессе пищеварения, приводит к дисбактериозу, лечить который – дело непростое. Так же происходит и с исчезновением вагинальной микрофлоры. Ее тут же заселяют условно-патогенные микроорганизмы, гарднереллы, например, которые вызывают бактериальный вагиноз (гарднереллез);
• Условно-патогенной флорой, которая приносит вред лишь в больших количествах при определенных условиях (иммунодефицит). Вышеназванная гарднерелла – представитель такого типа микроорганизмов;
• Наличием патогенных микробов, которые в здоровом теле не присутствуют. Они чужды человеческому организму, куда попадают случайно при контакте с другим (больным) человеком и вызывают развитие инфекционного процесса, порой, довольно тяжелого или даже смертельного. Например, встреча с возбудителями сифилиса – еще куда ни шло, на первых порах лечится, а вот (упаси Бог!) выпустит на волю холеру, чуму, черную оспу и др.

К счастью, многие из них побеждены и в настоящее время находятся «за семью печатями» в специальных лабораториях, однако человечество в любой момент должно быть готово к нашествию невидимого врага, способного уничтожить целые народы. Бактериологический посев в подобных случаях играет, пожалуй, главную роль в идентификации микроорганизма, то есть, определении рода, вида, типа и т.д. (токсономическое положение), что очень важно для диагностики инфекционных процессов, в том числе и заболеваний, передающихся половым путем.

Таким образом, методы посева, как и питательные среды, бывают разными, тем не менее, цель у них одна: получить чистую культуру без посторонних примесей в виде микробов других классов, которые обитают повсеместно: в воде, в воздухе, на поверхностях, на человеке и внутри его.

Когда назначается бак посев и как разобраться в ответах?

Название микроорганизма и его количество

Бактериологический анализ пациенты сами себе не назначают, это делает врач, если у него есть подозрения, что проблемы больного, предъявляющего различные жалобы, связаны с проникновением в организм патогенного возбудителя или с усиленным размножением микроорганизмов, постоянно живущих с человеком, но проявляющих патогенные свойства только в определенных условиях. Сдав анализ и через некоторое время получив на руки ответ, человек теряется, а порой и пугается, увидев непонятные слова и обозначения, поэтому, чтобы этого не произошло, хочется дать краткое разъяснение по данному вопросу:

1. Первым пунктом заключения, как правило, стоит название возбудителя на латинском языке, например, Escherichiacoli. Это – кишечная палочка, она является естественным обитателем кишечника и в допустимых количествах никакого вреда не приносит;
2. Следующий пункт – концентрация микроорганизма. Е.coli– обильный рост (1х10^ 6 и более) норма – менее 1x10^ 4 ;
3. Далее – патогенность: флора условно-патогенная.

При исследовании биологического материала на присутствие патогенных микроорганизмов ответ может быть отрицательным или положительным («плохой бак посев»), поскольку организм человека является для них лишь временным пристанищем, а не естественной средой обитания.

Иной раз, в зависимости от того, какой материал подлежит посеву, можно увидеть количество микроорганизмов, выраженное в колониеобразующих единицах на мл (одна живая клетка даст рост целой колонии) – КОЕ/мл. Например, посев мочи для бактериологического исследования при норме дает до 10 3 КОЕ/мл всех выявленных бактериальных клеток, в сомнительных случаях (анализ повторить!) – 10 3 – 10 4 КОЕ/мл, при воспалительном процессе инфекционного происхождения – 10 5 и выше КОЕ/мл. О двух последних вариантах в разговорной речи, порой, выражаются просто: «Плохой бак посев».

Как «найти управу» на патогенный микроорганизм?

Одновременно с посевом материала в таких ситуациях производится посев микрофлоры на чувствительность к антибиотикам, который даст четкий ответ врачу – какие антибактериальные препараты и в каких дозах «испугают» «незваного гостя». Здесь тоже есть своя расшифровка, например:

• Вид микроорганизма, допустим, та же Е.coli в количестве 1х10^ 6 ;
• Название антибиотика с обозначением (S) указывает на чувствительность возбудителя к этому препарату;
• Вид антибиотиков, не действующих на микроорганизм, обозначается символом (R).

Бактериологический анализ представляет особую ценность в определении чувствительности к антибиотикам, поскольку основной проблемой в борьбе с хламидией, микоплазмой, уреаплазмой и др. остается подбор действенного лечения, не приносящего вред организму и не ударяющего по карману пациента.

Таблица: альтернативный пример результатов бак-посева с выявлением эффективных антибиотиков

Правильная подготовка к бактериологическому анализу – залог достоверного результата

Бактериологическому анализу может подвергаться любой биологический материал, взятый у человека (кожа, кровь, сперма, слизистые ротовой полости, дыхательных и мочеполовых путей, желудочно-кишечного тракта, органов зрения, слуха и обоняния и др.). Чаще всего бак посев назначают гинекологи и урологи, поэтому на нем следует несколько остановиться.

Правильная подготовка к бактериологическому посеву будет залогом правильного результата, потому что в противном случае, анализ придется сдавать заново и ждать назначенное время. Как сдать кровь на стерильность из вены – это задача медработников. От больного здесь, как правило, ничего не зависит, он просто предоставляет локтевой сгиб, а медсестра производит забор в стерильную пробирку с соблюдением всех правил асептики и антисептики.

Другое дело – моча или мазок из половых путей. Здесь пациент должен обеспечить первый этап (забор), соблюдая предписанные правила. Следует заметить, что моча женщин и мужчин несколько отличается, хотя в мочевом пузыре у обоих полов она стерильна:

• У женщин при прохождении через мочеиспускательный канал может захватить небольшое количество непатогенных кокков, хотя в целом, часто остается стерильной;
• У мужчин все несколько по-другому. Передняя часть уретры может снабдить проходящую мочу находящимися там:
• дифтероидами;
• стафилококками;
• некоторыми непатогенными грамотрицательными бактериями, что и покажет впоследствии бактериологический анализ.

Однако, если они находятся в допустимой концентрации (до 10 3 КОЕ/мл), то пугаться нечего, это вариант нормы.

Чтобы избежать присутствия других микроорганизмов и максимально обеспечить стерильность взятого материала, перед сдачей анализа производится тщательный туалет половых органов (вход во влагалище у женщин закрывается ватным тампоном – защита от попадания отделяемого половых органов). Для анализа берется средняя порция мочи (начало мочеиспускания в унитаз, приблизительно 10 мл средней порции в стерильную баночку, окончание в унитаз). Пациентам необходимо знать: моча, взятая на посев, должна быть обработана не позднее, чем через два часа при хранении не выше 20°С, поэтому следует рассчитывать время на транспортировку.

Кроме этого материал на бак посев при необходимости берут из уретры и прямой кишки у мужчин, из уретры, прямой кишки, влагалища, шейки матки и цервикального канала – у женщин, но это происходит в медицинском учреждении, куда пациент должен прибыть. Подмывание, спринцевание и использование антисептических средств в таких случаях запрещено.

Другие вопросы, волнующие пациентов

Многие пациенты интересуются, сколько дней делается анализ. Однозначно на этот вопрос ответить нельзя, все зависит от того, какой материал подвергается исследованию и какой возбудитель нужно искать. Иногда ответ готов через 3 дня, иногда через неделю или даже дней 10 – 14, поскольку некоторые образцы требуют пересева на другую среду.

Не обходят стороной люди, направляющиеся на бак посев и вопрос о цене анализа. Примерная стоимость в Москве составляет порядка 800 – 1500 рублей. Разумеется, она может быть выше и зависит от широты спектра бактериологического поиска. Бесплатно анализ, наверное, можно сдать при беременности в женской консультации, или в поликлинике по особым медицинским показаниям.

Для беременных бак посев является обязательным, сдается 2 раза (при постановке на учет и в 36 недель), при этом, мазок берется не только из половых путей, но и со слизистых носа и зева. Объектом поиска в данном случае, кроме урогенитальных инфекций, будет золотистый стафилококк (Staphylococcus aureus), который в послеродовом периоде может натворить много бед (гнойный мастит и др). Кроме этого, беременным в обязательном порядке делается посев мочи, соскоба влагалищного эпителия и мазки из шейки матки и цервикального канала.

Многие женщины, перед тем как отправиться на процедуру очень боятся таких страшных слов и начинают раздумывать: «А нужно ли это? Может, не пойти». Спешим заверить, что анализы абсолютно безболезненны. Мазок из шейки матки и цервикального канала берется стерильной цитощеткой, не причиняя женщине абсолютно никакой боли, зато впоследствии бак посев из ш/м и ц/к защитит и будущую мать, и плод от возможных осложнений. Объектом поиска при беременности являются возбудители хламидиоза, уреа- и микоплазмы, дрожжеподобный грибок рода Candida (обычно это Candida albicans), трихомонады и другие условно-патогенные и патогенные микроорганизмы.

Видео: ролик-демонстрация по бак-посеву из цервикального канала

Частные случаи, особо интересные сдающим анализы

Попав в половые пути патогенные микроорганизмы, через самое короткое время осваиваются и начинают свою вредную деятельность. Например, всегда патогенные гонококки (Neisseria), являющиеся виновниками довольно неприятной болезни, называемой гонореей и относящейся к ЗППП, чувствуют себя «как дома» буквально на 3 день. Они начинают активно размножаться и смело двигаться по половым путям вверх, захватывая все новые территории. Всем известно, что гонорея нынче неплохо лечится и ее уже почти никто не боится. Но для начала ее нужно найти. Основным методом поиска этой инфекции считается бак посев, культивирование, идентификация с помощью окрашивания по Граму, микроскопия.

Найденные в мазке, взятом «на флору» из половых путей, попарно лежащие «кофейные зерна» (диплококки), не указывают на наличие венерического заболевания. Такая микрофлора влагалища часто появляется в постменопаузе и ни о чем плохом не говорит. Отобранный в нестерильных условиях на предметное стекло и окрашенный метиленовым синим или по Романовскому (цитология) мазок, не может дифференцировать микроорганизм. Он может только предположить и направить пациентку на дополнительное исследование (получение изолированной культуры).

Следует заметить, что, если соскоб со слизистых мочеполовых путей, взятый для посева на уреаплазму, является не таким уж редким явлением, то посева мочи сами врачи часто избегают, поскольку с ней работать сложнее.

Трудности в диагностике создает хламидийная инфекция, приносящая большой вред не только при беременности. Кроме этого, хламидия вызывает множество заболеваний, свойственных не только женщинам, но и мужскому населению тоже, поэтому ее сеют, культивируют, изучают, определяют чувствительность к антибактериальной терапии и, таким образом, борются с ней.

При беременности вообще без бактериологического посева трудно обойтись, поскольку многие микроорганизмы, маскируясь в цитологическом мазке, могут быть пропущены. Между тем, влияние некоторых возбудителей ЗППП на плод бывает губительным. К тому же лечить беременную женщину значительно сложнее, а назначать антибиотики «на глаз» просто недопустимо.

Методы посева

Для выделения чистых культур возбудителей на первом этапе прибегают к их посеву на соответствующие среды, который проводится в специальных (стерильных!) условиях. В основном, перенос материала на среду осуществляется с помощью приспособлений, применяемых еще в 19 века великим Луи Пастером:

• Бактериальной петлей;
• Пастеровской пипеткой;
• Стеклянной палочкой.

Конечно, многие инструменты за 2 столетия претерпели изменения, на смену пришли пластиковые стерильные и одноразовые, однако и старые не остались в прошлом, продолжая и поныне служить микробиологической науке.

Первый этап получения колоний требует соблюдения определенных правил:

1. Посев осуществляется над спиртовкой в боксе, предварительно обработанном дезинфектантами и кварцеванием, или в ламинарном шкафу, обеспечивающем стерильность в рабочей зоне;
2. Одежда медработника, перчатки и среда также должны быть стерильными, поскольку обратное мешает выделению изолированных штаммов;
3. Работать в боксе нужно быстро, но аккуратно, нельзя разговаривать и отвлекаться, при этом – необходимо помнить о личной безопасности, ведь материал может быть заразным.

Выделение штаммов и изучение чистых культур

Выделение штаммов не всегда одинаково, поскольку некоторые биологические среды, находящиеся в человеческом организме требуют индивидуального подхода, например, гемокультуру (кровь) сначала в жидкой среде (соотношение 1 : 10) немного «подращивают», поскольку кровь (неразведенная) может убить микроорганизмы, а затем, через сутки или больше, пересевают на чашки Петри.

Посев мочи, промывных желудочных вод и других жидких материалов тоже имеет свои особенности, где для получения чистой культуры, жидкость сначала следует центрифугировать (условия – асептические!), а уж затем сеять, причем не саму жидкость, а ее осадок.

Культивирование и выращивание колоний осуществляют на чашках Петри или помещают сначала в жидкую среду, разлитую в стерильные флакончики, а затем изолированные колонии еще раз высевают, но уже на скошенный агар и помещают материал на сутки в термостат. Убедившись в чистоте полученной культуры, штаммы переносят на предметное стекло, делают мазок и окрашивают по Граму (чаще всего), Цилю-Нильсену и др. и для дифференцировки изучают морфологию микроба под микроскопом:

• Размер и форму бактериальной клетки;
• Наличие капсул, жгутиков, спор;
• Тинкториальные свойства (отношение микроорганизма к окрашиванию)*.

*Читатель, вероятно, слышал о таком возбудителе, как бледная трепонема? Это – возбудитель сифилиса, а ее название (бледная) поэтому и появилось, что она плохо воспринимает краски и остается слегка розоватой при окрашивании по Романовскому. Микроорганизмы, невоспринимающие анилиновые красители называются грамотрицательными, а воспринимающие – грамположительные. Грамотрицательным бактериям придают розовый или красный цвет при окраске по Граму дополнительные красители (фуксин, сафранин).

Бак посев можно назвать древним анализом, однако его популярность от этого отнюдь не падает, хотя современная бактериология имеет возможности выделения не только штаммов, но и отдельной клетки из него, которая называется клоном. Однако для получения клона необходим специальный прибор – микроманипулятор, который в обычных лабораториях отсутствует, поскольку применяется, в основном, в научно-исследовательских целях (генетические исследования).